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华西药学杂志:冬虫夏草活性成分的含量研究概况
 
冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草 Cordyceps sinensis (Berk. ) Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体 ,具有补肺益肾、止血化痰、抗肿瘤、提高机体免疫力等功效。现代药物研究表明虫草中含有甘露醇、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟苷、尿嘧啶、麦角甾醇、氨基酸、虫草素及微量元素、矿质元素等成分 。现将近十年来国内对冬虫夏草部分活性成分的含量研究情况进行综述。
 
1 甘露醇
冬虫夏草中含有较大量的甘露醇。据药理研究及临床报道 ,甘露醇具有利尿、提高血浆渗透压、镇喘祛痰、抗自由基等作用 ,且对多种疾病有一定的疗效 ,故被认为是冬虫夏草的活性成分之 。甘露醇含量的测定方法文献报道较多的是氧化还原法、高效液相色谱法、气相色谱法、薄层扫描法。高效液相色谱法系应用差示折光检测进行测定;气相色谱法是先将冬虫夏草提取后 ,进行乙酰化反应转换成醋酸酯衍生物 ,再进行色谱分析;薄层扫描法是先用薄层色谱法对冬虫夏草中甘露醇进行分离 ,用高碘酸钾 - 联苯胺溶液显色 ,再进行双波长反射锯齿扫描。有文献采用比色法测定冬虫夏草及其类似品中甘露醇的含量,研究者认为比色法与薄层法定性测定具有较好的相关性 ,准确度高 ,比氧化还原法测定甘露醇含量更可靠 ,更具特异性且快速简便 ,可克服容量法因待测的冬虫夏草及其类似品中含有其他还原性物质 (单糖等) ,使测得结果偏高的缺点。许多文献对四川、青海、西藏、云南等省的冬虫夏草及其类似品中甘露醇的含量进行了测定。此外 ,杨跃熊等还测定了几个冬虫夏草主产地中分属不同种寄主昆虫的冬虫夏草中甘露醇的含量 ;王化远等按冬虫夏草发育状况分成 1、2、3 类 ,分别测定了 3 类冬虫夏草中子座及虫体中甘露醇的含量。研究结果表明 :冬虫夏草中甘露醇的含量主要与其产地、寄主及生长期等因素有关。国内学者对冬虫夏草中甘露醇的含量研究主要集中在对某一产地冬虫夏草的研究 ,今后应更加系统地研究不同产地冬虫夏草中甘露醇的含量及影响冬虫夏草中甘露醇含量的主要因素。值得注意的是研究时选用的测定方法不同也会因为方法本身的原因造成同一样品中甘露醇含量测定结果的差异。现对冬虫夏草类似品中甘露醇含量的研究开展得较少 ,主要体现在种类及样品数等方面 ,类似品是否能真正成为冬虫夏草的代用品还需作进一步的深入研究。
 
2 核苷类物质
核苷类物质(腺苷、尿苷、鸟苷) 为冬虫夏草有效成分之一 ,尤以腺苷具有明显的药理作用 ,如改善心脑血液循环、防止心律失常、抑制神经递质释放和调节腺苷酸环化酶活性等 。冬虫夏草中腺苷等核苷类物质的含量以往多采用薄层紫外分光光度法或高效液相色谱法测定。这两种方法前者准确性差 ,后者样品前处理繁杂。李绍平等采用毛细管电泳法来测定天然和人工冬虫夏草中腺
苷、尿苷、鸟苷等 3 种核苷类成分的含量 ,并对其变化进行了考察。结果表明 :天然和人工冬虫夏草中腺苷、鸟苷和尿苷 3 种核苷均以尿苷的含量最高 ,人工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草 ,这可能与人工培养品的代谢迅速有关。人工冬虫夏草中腺苷的含量差异显著 ,高低相差达 6 倍。而新鲜采集的天然冬虫夏草(如在青海玉树、湟中和云南采集的样品) 中腺苷等的含量极低甚至无法定量 ,而采集日久者核苷类成分含量却较高 ,提示天然冬虫夏草中核苷类物质可能来源于贮存过程中大分子核苷(酸) 的降解 ,为此 ,该文考察了湿热对冬虫夏草中核苷类物质含量的影响。发现湿热可明显增加冬虫夏草中核苷类物质的含量 ,在相对湿度 75 %、温度40 ℃的条件下放置 10 天 ,冬虫夏草中核苷类物质的含量可增加 1~4 倍。而人工冬虫夏草中腺苷、鸟苷和尿苷的含量却无明显变化 ,提示天然和人工冬虫夏草中核苷类成分有一定的差异。腺苷作为冬虫夏草的质量控制指标 ,不能客观反映天然冬虫夏草的质量。因此 ,腺苷在其质量控制中的应用尚值得进一步研究。
 
3 麦角甾醇
麦角甾醇是真菌类的特征甾醇 ,为一种重要的维生素 D2 原。李云华等采用将样品直接皂化 ,分配柱和吸附柱进行样品的净化和浓缩 ,建立了冬虫夏草及其制剂中麦角甾醇的高效液相色谱测定
法。李绍平等在该方法的基础上采用石油醚索氏提取 ,RP2HPLC 法测定。该方法样品前处理简便 ,回收率高 ,测定结果快速、准确、重复性好。用此方法对不同来源的天然与人工冬虫夏草中游离麦角甾醇含量进行比较 ,表明不同来源的天然冬虫夏草中游离麦角甾醇含量差异显著 ,但均明显高于人工虫草菌丝。
 
4 虫草多糖
虫草多糖的研究由来已久 ,早在 50 年代即已有虫草多糖的分子结构和药理作用的研究报道。日本和台湾对此有较系统的研究 ,并已申请专利(WO 9943698 ;US 5 ,582 ,828) 。国内的一些大专院校 ,如中国药科大学、上海中医药大学、北京大学及中国中医研究院等 ,也做了大量的虫草多糖研究。其药理作用主要是抗肿瘤、降糖、抗免疫损伤性大鼠肝纤维化、提高免疫等。虫草多糖的提取常用乙醇沉析法。余晓斌等对虫草多糖的提取工艺进行了优化实验 ,经 SAS- RSREG程序计算出回归方程 ,以虫草多糖沉析量回归模型进行数学分析 ,得出乙醇沉析法的优化条件为 :乙醇Π发酵液(3. 8∶1) ;醇析时间 12 h ;pH 7. 65 ,虫草多糖析出量为 11. 36 g·L- 1 。在虫草多糖沉析过程中 ,乙醇添加量对多糖沉析的影响最大 ,其次是 pH 值 ,当 pH 7. 65 时沉淀量最大 ,可能是因为虫草多糖分子带电荷有关。多糖的测定采用干重法 ,将乙醇沉淀下来的虫草多糖过滤 ,并烘干至恒重称量。
 
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